首先由两名病理学医生(JK,HAB)对训练数据集性别、年龄、身高、体重和BMI,以及血清参数ALT、AST、AST/ALT比值、GGT、白蛋白、三酰甘油、总胆固醇、空腹血糖、HbA1c、血小板计数、半胱氨酸清除的血清CK-18、和脂联素等参数进行统计。
之后对训练集中164名患者数据进行组合特征选择(EFS,ensemble feature selection,名解1)确定年龄、γGT、HbA1c、脂联素和M30是与NAFLD高度高度相关的生物标记物,导入逻辑回归进行模型开发,开发出能够预测NAFLD活动评分(NAS)的网络模型。验证模型性能时,导入验证集的122名患者数据,采用10倍交叉验证的方式进行验证,利用PROC计算数据的操作特性(ROC)曲线和相应的曲线下面积(AUC)。通过2000次分层自举重复计算得出95%置信区间。采用Spearman等级相关系数(名解2)进行相关性分析。
实验最后为了进一步分析了新的网络评分模型对疾病监测的潜力,于是在接受生活方式干预治疗一年的38名肥胖症患者数据队列中进行了测试。结果表明:
现有的无创评分体系与NAFLD严重程度的组织学评估无关。实验分别计算了APRI、BARD、Gholam评分、NAFLD纤维化评分(NFS)、Palekar评分和NAS以及纤维化之间的相关性。只有APRI(r=0.3269,p<0.001)(图1AB)和Gholam评分(r=0.3670,p<0.0001)与NAS有显著正相关,而其他评分则没有(图1CDE)在纤维化方面以上评分均无相关性。
在训练集中实验的新网络评分对NASH进行预测,准确率较高。实验的新网络评分预测得分与NAS高度相关(r=0.4473;p<0.0001;图2A),模型的AUC值达到0.7339(95%CI:0.6567-8111;p<0.0001;图2B)。与所有其他测试分数相比,该模型的AUC显著更高。虽然没有发现新的评分与纤维化分期相关,但区分中晚期纤维化的ROC曲线的AUC值达到0.8117(95%CI:0.6964~0.9271;p=0.03;晚期纤维化n=4)。
新的网络评分在验证集中也实现了高精度。在验证队列中,新的网络评分表现与训练集相似。得分与NAS显著相关(r=0.2792;p=0.002;图3),模型的AUC值达到0.7028(p=0.0007;图3B)。
新的网络评分表明减肥治疗对恢复新陈代谢健康的有效性。新的网络评分表明患者体重的增加与减轻、腰围减少和基础代谢率的改变有着直接的关系,肝脏和脂肪组织的功能可能是减肥效率的决定因素(图4)。38名接受减肥治疗1年的患者根据新评分的降低(23例)或增加(15例)进行分组。在研究结束时积分值降低的组中,实验发现在研究开始(W0)和结束时(W52)两个时间点血清白蛋白(和生长激素释放蛋白(图4B)浓度显着升高。相反,在减肥治疗期间积分下降的患者中,不饱和脂肪酸棕榈酸(C16:0)的浓度都显著降低。